对低分子有机溶剂/无机盐双水相体系萃取分离发酵液中1,2,4-丁三醇(1,2,4-butanetriol,BT)进行了深入研究。通过对不同双水相体系的筛选,最终选定无水乙醇/K2HPO4双水相体系来萃取分离BT。使用浊点法对以BT为溶剂的无水乙醇/K2HPO4双水相体系进行相图的绘制,发现在K2HPO4质量分数为19.83%~46.87%范围内均能成相。通过单因素实验,考察双水相体系中无水乙醇/K2HPO4质量分数、pH对BT在两相之间分配系数和萃取效率的影响,得到最佳萃取条件为:系统总量10g、pH 9.5,无水乙醇/K2HPO4的质量分数为28%/28%,分配系数和萃取效率分别可以达到18.35和95.87%。在最佳萃取条件下,进一步探究了放大实验对体系萃取效率的影响,发现其对分配系数和萃取效率影响较小,体系稳定性高,为工业提取发酵液中BT提供新思路。