新型异亮氨酸双加氧酶及其重组大肠杆菌合成羟基异亮氨酸
付敏杰1， 聂尧1， 穆晓清1， 徐岩1，2， 肖荣3
- 1江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122；2江南大学食品生物技术国家重点实验室，江苏 无锡 214122；3罗格斯大学高级生物技术与医学中心，新泽西州 08854，美国
A novel isoleucine dioxygenase and its expression in recombinant Escherichia coli for synthesis of 4-hydroxyisoleucine
FU Minjie1，NIE Yao1，MU Xiaoqing1，XU Yan 1，2，XIAO Rong3
- 1School of Biotechnology，Key Laboratory of Industrial Biotechnology of Ministry of Education，Jiangnan University，Wuxi 214122，Jiangsu，China; 2State Key Laboratory of Food Science and Technology，Jiangnan University，Wuxi 214122，Jiangsu，China; 3Center for Advanced Biotechnology and Medicine，Rutgers University，New Jersey 08854，USA
摘要： 异亮氨酸双加氧酶（IDO）可特异性的转化底物L-异亮氨酸（L-Ile）生成4-羟基-L-异亮氨酸（4-HIL），该产物具有促进胰岛素分泌的功能，可用于抗糖尿病、降胆固醇等。本研究结合了酶标显色和薄层层析（TLC）的方法从自然界中筛到了具有IDO活性的菌株，并将该菌株中的目的基因ido克隆到大肠杆菌中，获得重组表达菌株，并且验证该菌具有IDO的转化功能。本研究优化了转化反应体系和条件，同时通过30℃过夜温育菌体细胞的方法，使该菌株全细胞转化合成4-HIL的产率达到85%以上。